梯度實(shí)驗(yàn)常見的問題與解決方案

    眾所周知，做HPLC分析時(shí)梯度系統(tǒng)可以在大大縮短分析時(shí)間的同時(shí)而不影響樣品的分離，但是簡便的同時(shí)也伴隨著多種多樣的問題，就筆者個(gè)人總結(jié)，常見的問題有三點(diǎn)：

（1）兩相混合后產(chǎn)生氣泡

如下圖：

    上圖為緩沖鹽溶液與純甲醇走梯度產(chǎn)生的氣泡圖，對此我們公司通常的解決方法是使用“反壓調(diào)節(jié)器”使紫外檢測池有一定的壓力，阻止氣泡形成。其次通常我們不建議使用純的有機(jī)相如純甲醇，純乙腈作流動相。

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偶然情況為流動相未經(jīng)良好脫氣，溶解氧能與某些有機(jī)溶劑形成有紫外吸收的絡(luò)合物，而出現(xiàn)很強(qiáng)的吸收，此種情況沒有重復(fù)性，可以通過良好的流動相脫氣而避免。如下圖：